ساخت ناقل یوکاریوتی دو سیسترونی بیان کننده ژن‏های m۱ و نوکلئوپروتئین ویروس آنفلوانزا
نویسندگان
چکیده
هدف: در این پژوهش در راستای راهاندازی یک واکسن جامع براساس واکسن ژنی، دو ژن محافظت شده در سویهها و زیرگونههای مختلف ویروس آنفلوانزا (m1 و نوکلئوپروتئین) در ناقل دوسیسترونی یوکاریوتی بیان شد. مواد و روشها: پلاسمیدهای m1-pires2-egfp و pires2-np بهترتیب با کلون کردن محصولات pcr ژنهای m1 و نوکلئوپروتئین برگرفته از ویروس آنفلوانزا h1n1 سویه a/peurto rico/8/34 در داخل ناقل بیانی pires2-egfp ساخته شد. بهمنظور ساخت پلاسمید دو سیسترونی m1-pires2-np، ژن m1 از پلاسمید m1-pires2-egfp استخراج و در پلاسمید pires2-np ساب کلون شد. در نهایت بررسی بیان این دو پروتئین در سلولهای یوکاریوتی با ترانسفکشن کلون ساخته شده به داخل سلول bhk-21 با استفاده از ایمونوفلوئورسنس غیرمستقیم انجام شد. نتایج: موفقیت در کلونینگ صحیح ژنهای مذکور با هضم آنزیمی و تعیین توالی قطعات کلون شده به اثبات رسید. بیان صحیح این دو ژن در سلولهای یوکاریوتی با ترانسفکشن این کلون در رده سلولی bhk-21 و بررسی با روش ایمونو فلورسنس به اثبات رسید. نتیجهگیری: بیان همزمان دو ژن m1 و نوکلئوپروتیئن ویروس آنفلوانزا در یک سازه ژنی با واسطه توالی ires ممکن است.
منابع مشابه
ساخت و آنالیز بیان ناقل گیاهی pCaBGi
بیان موقت مبتنی بر تزریق اگروباکتریوم در برگ گیاه روش نسبتاً سریع و قابل اعتمادی برای آنالیز توالی‌های تنظیمی است. به منظور بهره‌گیری از مزایای این تکنیک یک ناقل بیانی مناسب برای انجام آزمون بیان موقت عناصر تنظیمی مبتنی بر تزریق اگروباکتریوم مورد نیاز است. در این مطالعه بمنظور ساخت یک ناقل بیانی گیاهی، جایگاه‌های آنزیمی مناسب از وکتور pBGi به عنوان قطعه در نظر گرفته شد و وکتور pCAMBIA3301 حامل ژ...
متن کاملارزیابی ایمونولوژیکdna واکسن بیان کننده ژن m۲ ویروس آنفلوانزا در مدل موشی آنفلوانزا
چکیده زمینه و هدف: با به کارگیری ژنm2 که پروتئین حفاظت شده ویروس آانفلوانزا را بیان می کند می توان واکسن پایدار و ثابتی را تولیـد کرد که نیاز به تجدید سالیانه را مرتفع سازد. روش بررسی: به سه گروه موش به تفکیک pcdna3-m2 و گروه های کنترل منفی pcdna وpbs در سه دوز و به فاصله دو هفته تزریق شد. دو هفته پس از آخرین تزریق، میزان ایمنی سلولی با به کار گیری روش تکثیر لنفوسیتی mtt و سنجش اینترفرون گاما ...
متن کاملارزیابی روش تزریق عضلانی و داخل جلدی پلاسمید باکتریایی حاوی ژن نوکلئوپروتئین ویروس آنفلوانزا
هدف: استفاده از واکسنهای ژنی بر پایه کاربرد پلاسمیدهای باکتریایی بهمنظور القای ایمنی سلولی بر ضد عوامل بیماریزا یکی از رویکردهای نوین بهشمار میرود. ساز و کارهایی که توسط آن سلولهای ایمنی اختصاصی بر ضد آنتیژن عرضه شده توسط واکسنهای پلاسمیدی شکل میگیرند، هنوز بهطور کامل شناخته شده نیست. از اینرو، لازم است تا چند راه تزریق واکسن بهمنظور یافتن بهترین راه ایمنسازی در مورد هر آنتیژن منح...
متن کاملطراحی و ساخت یک سازه ژنی نوترکیب بیان کننده پروتئین p24 ویروس لکوز گاوی در اشرشیاکلی
لکوز انزئوتیک گاوی(EBL) یک بیماری رتروویروسی است که بوسیله ویروس لکوز گاوی (BLV) ایجاد و عموماً در دامداریهای صنعتی مشاهده میشود. این بیماری موجب کاهش توان تولید و بروز خسارتهای اقتصادی قابل توجه در گله میشود. کنترل عفونتهای ناشی از BLV با انجام آزمایشهای سرولوژی، شناسایی و جداسازی یا حذف حیوانات سرم مثبت انجام میگردد. در این مطالعه، ژن پروتئین p24 از BLV پس از تکثیر توسط PCR، به پلاسمید...
متن کاملبیان دو سیسترونی ژنهای رمز کننده آنتی‌بادی مونوکلونال trastuzumab در توتون با استفاده از یک توالی جایگاه میانی ورود ریبوزوم
آنتی‌بادی‌های مونوکلونال هترودایمرهای متشکل از چهار زنجیره پپتیدی، دو زنجیره سبک (L) یکسان و دو زنجیره سنگین (H) یکسان هستند. بیان همزمان مقدار برابر ژنهای رمز کننده برای تولید پایدار و گردایش به صورت یک آنتی‌بادی کارکردی ضروری است. به منظور بیان همزمان چندین ژن، سیستم‌های مختلفی از جمله وکتورهای مبتنی بر جایگاه میانی ورود ریبوزوم (IRES) توسعه یافته‌اند. در مطالعه حاضر، یک حامل دی‌سیسترونیک ب...
متن کاملکلونینگ و بیان پروتئین M2 ویروس آنفلوانزا H1N1 در باکتری Ecoli سویه BL21(DE3)
سابقه و هدف: ویروس انفلوانزا A یکی از عوامل اصلی مرگ ومیر سالیانه می باشد و از سال 1960 میلادی بر علیه آن واکسن موثر در دسترس بوده است. تغییرات مداوم آنتی ژنیک ویروس چالش بزرگی در مسیر تولید سالیانه واکسن می باشد. در حال حاضر محققین روی آنتی ژنهای ثابت ویروس مطالعه می کنند. پروتئینM2 یک کانال یونی درون پوشش ویروس انفلوانزای A تشکیل می دهد که در عفونت زایی آن موثر است. این پروتئین حفاظت شده ا...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
پژوهش های آسیب شناسی زیستیجلد ۱۴، شماره ۲، صفحات ۵۱-۶۲
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023